Slide mikroskop digunakan untuk memeriksa organisme bersel tunggal dan untuk melihat dari dekat tanaman dan organisme kecil. Ada dua jenis slide yang disiapkan: tunggangan kering dan tunggangan basah. Setiap jenis metode preparasi digunakan untuk memasang berbagai jenis sel. Jika Anda basah saat memasang spesimen yang sangat pucat atau tembus cahaya, Anda mungkin perlu menodai spesimen agar terlihat di bawah mikroskop.
Langkah
Metode 1 dari 3: Mempersiapkan Mount Kering
Langkah 1. Pilih slide yang bersih
Pegang slide ke sumber cahaya dan lihat untuk memastikannya bebas dari noda dan kotoran. Kebanyakan slide mikroskop datar di atas dan bawah dan berbentuk persegi panjang. Mereka jelas, memungkinkan cahaya dari mikroskop untuk melewati dan menerangi spesimen sampel yang tembus cahaya. Jika slide Anda kotor atau tercoreng, Anda tidak akan dapat memeriksa spesimen Anda secara efektif.
Jika Anda menemukan bahwa slide mikroskop Anda memiliki kontaminasi - termasuk sidik jari Anda sendiri - cucilah dengan sabun cair dan air. Keringkan slide menggunakan kain bersih. Jangan gunakan tisu atau handuk kertas, karena dapat meninggalkan serat
Langkah 2. Periksa spesimen untuk menentukan apakah perlu diiris
Spesimen sampel harus tembus cahaya (atau semitransparan) hingga transparan agar cahaya dapat melewatinya. Jika cahaya tidak dapat sepenuhnya melewati spesimen dan masuk ke lensa mata mikroskop, Anda tidak akan dapat melihat spesimen melalui mikroskop.
Beberapa spesimen (misalnya, sehelai rambut atau sayap serangga) tipis dan tembus pandang, dan tidak perlu diiris dengan pisau silet
Langkah 3. Iris sepotong tipis spesimen sampel
Gunakan pisau silet untuk memotong bahan spesimen menjadi irisan tipis dan tembus pandang. Mount kering adalah yang paling sederhana untuk disiapkan karena tidak menggunakan cairan apa pun di antara slide dan spesimen. Dudukan kering sangat ideal untuk memeriksa sampel yang tidak berisiko mengering. Bahan-bahan yang biasanya dipasang kering meliputi:
- Kayu gabus atau balsa.
- Kelopak bunga atau daun.
- Kaki atau sayap serangga.
- Rambut, bulu, atau bulu.
Langkah 4. Tempatkan spesimen sampel pada slide
Gunakan sepasang tang untuk mengambil irisan tipis spesimen sampel Anda. Letakkan dengan hati-hati di satu sisi slide. Jika Anda menggunakan slide cekung (di mana satu sisi turun), letakkan benda uji di tengah area cekung.
- Pasang spesimen pada slide cekung jika Anda khawatir spesimen akan menggelinding atau meluncur dari slide datar. Misalnya, gunakan slide cekung jika Anda menyiapkan kelopak bunga melengkung yang berguling ke satu sisi atau sisi lainnya.
- Untuk semua jenis spesimen lainnya, slide datar akan berfungsi dengan baik.
Langkah 5. Pasang kaca penutup di atas spesimen sampel
Slip penutup mencegah spesimen sampel jatuh dari slide. Slip juga akan melindungi spesimen sampel jika salah satu pengguna mikroskop secara tidak sengaja menurunkan lensa sedemikian rupa sehingga menyentuh spesimen.
- Slip penutup adalah potongan kaca yang sangat tipis dan transparan atau, lebih umum, plastik. Setiap slip adalah tentang 3⁄4 inci (1,9 cm) baik lebar maupun panjangnya.
- Slide yang Anda siapkan sekarang siap untuk diperiksa di bawah mikroskop.
Metode 2 dari 3: Mempersiapkan Mount Basah
Langkah 1. Tempatkan 1 tetes air ke slide Anda
Gunakan pipet untuk menjatuhkan 1 tetes air ke bagian tengah yang tepat dari slide datar atau cekung. Tetesan air inilah yang memberi nama gunung basah. Cairan menjaga spesimen sampel tetap lembab dan mencegah spesimen sampel organik yang basah mengering dan mengubah bentuknya. Air juga mengawetkan spesimen hidup, seperti organisme bersel tunggal.
Jika Anda ingin membuat slide permanen menggunakan bahan organik mati, Anda dapat menggunakan lapisan tipis cat kuku bening sebagai pengganti tetesan air
Langkah 2. Kerok atau iris bagian spesimen sampel basah
Spesimen sampel yang digunakan untuk tunggangan basah biasanya adalah bahan organik basah atau hidup. Gunakan pisau cukur atau tusuk gigi untuk memotong atau mengikis sedikit spesimen basah Anda. Bahan yang biasa digunakan untuk membuat slide mount basah antara lain:
- Sel pipi atau plak gigi (dikikis dari mulut dengan tusuk gigi).
- Penampang melintang batang tanaman yang tipis (dipotong dengan silet).
- Jika Anda mempelajari organisme bersel tunggal, misalnya, pinset amuba atau paramecium tidak akan banyak berguna. Sebagai gantinya, gunakan pipet bersih untuk mengambil beberapa tetes air tempat organisme bersel tunggal atau ganggang berenang.
Langkah 3. Tempatkan spesimen sampel Anda di setetes air Anda
Bergantung pada jenis bahan yang Anda gunakan sebagai spesimen sampel Anda, gunakan sepasang tang, pinset, atau tusuk gigi untuk memindahkan spesimen Anda ke slide. Tempatkan spesimen di tengah tetesan air Anda, sehingga tersuspensi dalam cairan.
Jika Anda menggunakan pipet untuk mengambil organisme bersel tunggal, letakkan 1 atau 2 tetes ke dalam tetesan air yang sudah ada di slide
Langkah 4. Pasang kaca penutup di atas benda uji basah
Pegang slip penutup pada sudut 45°. Letakkan salah satu ujungnya tepat di sebelah spesimen pada tetesan air. Kemudian turunkan sisi lain dari slide sampai rata di atas spesimen. Anda akan melihat tetesan air menyebar di bawah kaca penutup sampai mencapai tepinya.
Jangan mengetuk atau menekan slip penutup setelah terpasang di tempatnya. Jika Anda melakukannya, Anda akan mengambil risiko meremas spesimen sampel dan air dari slide
Metode 3 dari 3: Pewarnaan Spesimen Seluler
Langkah 1. Tempatkan selembar handuk kertas pada salah satu ujung kaca penutup
Letakkan handuk di tepi slip tanpa mengganggu bahan di bawah kaca penutup. Handuk kertas penyerap akan menarik sebagian air keluar dari bawah kaca penutup, dan menarik zat pewarna di bawah kaca penutup dan ke spesimen.
- Jika spesimen slide yang dipasang basah berwarna pucat atau tidak berwarna (misalnya penampang batang tanaman yang tidak berwarna), mungkin sulit untuk dilihat saat melihat melalui mikroskop. Pewarnaan spesimen akan memungkinkan Anda untuk melihat bentuk dan teksturnya dengan lebih baik.
- Hal ini biasanya dilakukan setelah Anda memeriksa spesimen basah dalam slide tanpa pewarnaan. Slide mungkin sudah disiapkan, meskipun tidak ternoda.
Langkah 2. Tempatkan 1 tetes yodium atau metilen biru di sisi lain kaca penutup
Gunakan pipet dan teteskan bahan kimia pewarna di atas kaca objek mikroskop, tepat di sebelah kaca penutup. Hati-hati untuk hanya mengeluarkan 1 tetes. Zat pewarna yang berlebihan dapat keluar dari slide.
- Yodium atau biru metilen dapat dibeli di toko pendidikan atau toko perlengkapan biologi mana pun.
- Cara alternatif untuk melakukannya adalah dengan menambahkan setetes zat pewarna ke air pada slide yang dipasang basah saat Anda pertama kali menyiapkannya. Dalam hal ini, Anda tidak perlu handuk kertas.
Langkah 3. Tunggu sementara zat pewarna ditarik di bawah penutup slide
Zat pewarna akan mulai merembes di bawah kaca penutup saat handuk kertas mengeluarkan air dari sisi yang lain. Mungkin diperlukan waktu selama 5 menit agar yodium atau metilen biru meresap sepenuhnya di bawah penutup slide dan menjenuhkan spesimen.
Setelah yodium atau biru metilen telah ditarik sepenuhnya di bawah penutup slide, spesimen sepenuhnya diwarnai
Langkah 4. Bersihkan bahan pewarna berlebih dengan handuk kertas bersih
Bersihkan permukaan slide sehingga tidak ada cairan yang tumpah dari samping. Slide basah Anda sekarang diwarnai dan siap untuk diamati di bawah mikroskop.
